dss造模原理肠炎模式动物造模

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《肠炎模式动物造模解决方案 | 葡聚糖硫酸钠DSS》

结直肠癌是世界范围内肿瘤患者的第三大死因，它是一种自发性、慢性结肠黏膜炎症病变，其发病机制目前尚未清楚。但研究发现，人类最常见的两种慢性炎症性肠道疾病(IBD)是溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis，UC)和 Chron’s疾病(CD)，它们均与结直肠癌发生相关。自从日本学者于1985年首次应用硫酸葡聚糖（DSS）制备了鼠UC模型后，大量的动物模型被应用于UC的研究，而DSS结肠炎模型是目前应用最为广泛的UC模型之一。

UC建模概述

现行研究中最常用的UC建模类型大约分为：自发模型、诱导模型（化学药物诱导：TNBS三硝基苯磺酸，DSS葡聚糖硫酸钠等、免疫学方法诱导、细胞移植诱导）以及基因修饰模型等。

葡聚糖硫酸钠盐（Dextran Sulfate Sodium Salt, DSS）是一种聚阴离子衍生物，其诱导结肠炎模型的机制虽仍未十分明确, 但通常认为与巨噬细胞功能失调、肠道菌群失调、DSS对结肠上皮的毒性作用、细胞因子在DSS结肠炎模型的发病中起重要作用（肿瘤坏死因子、白介素、干扰素、IL-10和IL-12）等机制有关。

对比多种UC建模类型，DSS造模具有很大的优势，可以说是目前肠炎造模研究领域金标准。

DSS造模的优势大约可以总结为以下几点：

·症状、体征以及病理特征等完全与人类UC基本一致；

·周期可长可短，能够模拟急性肠炎，慢性肠炎以及肠炎修复模型；

·方法简单，可重复性，维持性好；

·可作为研究人类UC的致炎机制及抗炎药物模型，也可以作为免疫机制及遗传学研究的模型。

MP Biomedicals生产的DSS具有高质量、高纯度、高重复性的特点。迄今为止，有超过8000篇科学文献引用，有效性得到了业界广泛认可。

给小鼠正常喂食并用2%的DSS代替饮用水，持续一周，然后处死。每天监测每只小鼠的体重。数据表示方法为SD标准差(数据来源于Bamba S. et al., (2012). Dig Dis Sci, 57(2): 327-34)。

产品名称	货号	包装
葡聚糖硫酸钠（DSS）	0216011010	10g
	0216011050	50g
	0216011080	100g
	0216011090	500g

MP产品优势：

·提供最高的硫含量（18-20%），＜0.2%的游离硫酸钠（影响造模成功的决定因素）；

·最高手性；

·最高纯度（99%）和稳定性；

·行内性价比最高的造模产品；

·超过8000篇文献引用。

DSS建模实验步骤

小鼠急性\慢性结肠炎模型示意:

葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价：

DSS肠炎造模的观察指标和方法：

1.疾病活动指数（DAI）的评估：包括体重，大便性状和血便；

DAI评分标准：

体重下降（%）	大便性状*	大便隐血/肉眼血便	记分
0	正常	正常	0
1~5	松散	隐血阳性	1
5~10			2
10~15	稀便	肉眼血便	3
＞15			4
*正常大便：成型大便；松散大便；不黏附于肛门的糊状、半成形大便；稀便：可黏附于肛门的稀水样便。

2.组织学损伤指数（HI）的评估：观察结肠内有无出血，溃疡等。取一小块组织常规石蜡包埋、切片、HE染色，观察组织学改变并进行评分；

3.病理切片，HE染色观察。

DSS肠炎模型应用

MP的DSS具有高质量、高纯度、可重复性的特点。可用于溃疡性结肠炎病因、发病机制的研究，炎症反应中免疫学研究，溃疡性结肠炎治疗，抗炎药物的研发、炎症相关性的癌症形成机制的研究等。可有效用于临床、分子生物学、生物医学甚至是化妆品行业。

AOM联合DSS高效诱导结直肠肿瘤应用

偶氮甲烷（Azoxymethane, AOM ）

一种甲基化剂，可以在DNA中形成6-O-甲基鸟嘌呤，导致碱基错配，从而诱导组织中的肿瘤形成。

产品名称	货号	包装
偶氮甲烷AOM	02180139.1	10g

AOM/DSS 模型

AOM常与致炎剂DSS协同作用，可诱导炎症性肠病（IBD）逐步发展为炎症相关的结直肠肿瘤。AOM/DSS模型能够很好地模拟慢性肠道炎症诱发肿瘤的病理过程，被广泛用于炎症相关性肿瘤形成机制的研究。

AOM+DSS诱导的结肠肿瘤模型病理HE染色

AOM/DSS造模优势：

·方法简单；

·重复性高；

·7-10周即可建立肿瘤模型；

·可用于任何遗传背景的动物（敲除、转基因等)。

无PCR基因简单快速提取应用

MP出品FastDNATM Spin粪便试剂盒是基于DSS在基因提取应用上的重要突破。FastDNATM Spin粪便试剂盒可从新鲜或冷冻的人或动物的粪便样本中纯化基因组DNA，无需使用其他有机溶剂。该试剂盒包含裂解介质E，与Fastprep-24 5G配合使用可在40秒内裂解样本。使得样本中的基因组DNA、少量的RNA、腐殖酸或多酚等污染物充分释放到溶液中，离心后，基因组DNA被结合到Geneclean®专利的硅胶基质上，然后再用洗脱液将DNA洗脱下来，去除RNA、PCR抑制剂及有机污染物。得到的DNA可直接用于PCR、Real-Time PCR、传染病研究和筛查等下游实验。方便的离心柱纯化过程使得实验操作更加简单、便捷。

其与FastPrep-24TM 5G快速样品制备仪配合使用，粪便样本能够在短短几十秒内破碎。

利用FastDNATM Spin粪便试剂盒，从粪便样本中提取得到的基因组DNA的凝胶电泳结果。1.2%的凝胶(0.5X TE)。①DNA Marker ②牛粪便，200ng DNA ③马粪便，200ng DNA ④猫粪便，200ng DNA ⑤鸟粪便，200ng DNA

参考文献：

1. Q. Jia, I.Ivanov, Z.Zlatev, et al., Dietary _sh oil and curcumin combine to modulate colonic cytokinetics and gene expression in dextran sulfate sodium treated mice, Br.J.Nutr., 2011;106(4),519-9.

2. R.Arsenescu, V.Arsenescu, J.Zhong et al, Role of xenobiotic receptor in in_ammatorybowel disease, In_amm.Bowel Dis.,2011;17(5), 1149-2.