因为没有做过实验，而且英文不咋地，我手上有英文说明书，大概知道；但是，具体步骤还是有点混乱，帮帮我这个初学者吧！我讲感激不尽！由衷的感谢您！

这是我翻译的，但是还是觉得不对，现在不知道怎么办了？请帮下我吧！

TUNEL凋亡检测：

Step 1:60℃烤片30min，二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，双蒸水。

Step 2:破膜剂中孵育8分钟0.1% Triton X–100, 0.1% sodium citrate,freshly prepared(或者• Place the slide(s) in a plastic jar containing 200 ml 0.1 M Citrate buffer, pH 6.0.• Apply 350 W microwave irradiation for 5 min.，若选择微波照射时，与下面微波照射作用有什么不同？？？)

Step 3:PBS冲洗3×5min

Step 4:侵入塑料瓶子200ml0.1MpH6.0柠檬酸盐缓冲液修复

Step 5:750W微波照射1分钟

Step 6:立即添加20-25℃双蒸水80ml冷却(自然冷却)

Step 7:PBS冲洗3×5min

Step 8:侵入0.1M Tris-HCl,pH 7.5 30分钟,(包含3% BSA牛血清白蛋白和20%牛血清)

Step 9:PBS冲洗3×5min遍，擦片

Step 10:滴加50ul配置好的TUNEL工作液。阴性对照组滴加50ul 2号液。阳性对照组在TUNEL前滴加DNase I recombinant.

Step 11:37℃湿盒中避光孵育1小时

Step 12:PBS冲洗3×5min

Step 13:50%甘油硫酸盐缓冲液封片，激光共聚焦显微镜下观察。